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斑潛蠅隸屬雙翅目(Diptera)潛蠅科(Agromyzidae)斑潛蠅屬(Liriomyza),是一類重要的農(nóng)業(yè)害蟲。近年來,隨著海峽兩岸果蔬貿(mào)易的快速發(fā)展,斑潛蠅類害蟲傳入大陸地區(qū)的風險明顯增加,植物檢疫部門急需該類害蟲的快速鑒定技術和方法。本研究針對我國進境檢疫性害蟲三葉草斑潛蠅(L.trifolii),在檢測和檢索其線粒體DNA細胞色素氧化酶I(mtDNA COI)基因序列并與其近緣種美洲斑潛蠅(L.sati-vae)和南美斑潛蠅(L.huidobrensis)相同基因序列比對的基礎上,設計并篩選了其種類識別特異引物,初步實現(xiàn)了三葉草斑潛蠅的快速鑒定。
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利用真菌DNA-ITS區(qū)序列中的通用引物ITS1和ITS4,以黃瓜棒孢葉斑病菌的基因組DNA為模板,進行PCR,擴增出1條600 bp大小的條帶。進行序列分析后發(fā)現(xiàn)其為黃瓜棒孢葉斑病菌的基因序列。根據(jù)黃瓜棒孢葉斑病菌(Corynespora cassiicola)與其他黃瓜病原真菌ITS序列間的差異,設計了1對特異性引物CCC1/CCC2,用于黃瓜棒孢葉斑病的種子帶菌分子檢測,從而對來自北京郊區(qū)黃瓜種子上的棒孢葉斑病的帶菌情況進行了檢測,發(fā)現(xiàn)來自房山和通州的黃瓜種子均在約600 bp出現(xiàn)特異性條帶,說明黃瓜種子中攜帶棒孢葉斑病菌。
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