紙電泳(Paper Electrophoresis,PE)指用濾紙作為支持介質的電泳方法,是最早使用的區帶電泳。在對某些蛋白質(如糖蛋白、脂蛋白等)的分離尤其對氨基酸混合物的分離非常有效。
將濾紙條水平架設在兩個裝有緩沖溶液的容器之間,樣品點于濾紙中央。當濾紙條被緩沖液潤濕后,再蓋上絕緣密封罩,即可由電泳電源輸入直流電壓(100V~1000V)進行電泳。
醋酸纖維素薄膜電泳的特點是分離速度快、電泳時間短、樣本用量少,特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測,廣泛用于分離和測定血清蛋白、血紅蛋白、糖蛋白、結合球蛋白、脂蛋白、同工酶等的臨床醫學檢驗。電泳時經過膜的預處理、加樣、電泳、染色、脫色與透明即可得到滿意的分離效果。
凝膠電泳(Gel Electrophoresis)是由區帶電泳派生出的一種用凝膠物質作為支持物的電泳方式。常用的凝膠為葡萄糖、交聯聚丙烯酰胺和瓊脂糖。這種介質具有多孔性,有類似于分子篩的作用,流經凝膠的物質可按分子的大小逐一分離,因此廣泛用于測定蛋白質的分子量。
等電聚焦電泳(Isoelectric Focusing Electrophoresis,IFE)是一種利用有pH梯度的介質,分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。將等電點不同的蛋白質混合物加入有pH梯度的凝膠介質中,在電場內經過一段時間后,各組分將分別聚焦在各自等電點相應的pH值位置上,最后,樣品的各組分在各自的等電點聚焦成一條清晰而穩定的窄帶。
等速電泳(Isotachophoresis,ITP)采用兩種不同濃度的電解質組成,一種為前導電解質,充滿整個毛細管柱;另一種為尾隨電解質,置于一端的電泳槽中。前導電解質的遷移率高于任何樣品組分,后者則低于任何樣品組分,被分離的組分按其不同的遷移率夾在中間,在強電場的作用下,各被分離組分在前導電解質與尾隨電解質之間的空隙中移動,實現分離。
雙向凝膠電泳又稱二維凝膠電泳,主要用于分離和分析混合的蛋白質組分,是優于其它方法能夠連續地在一塊膠上分離數千種蛋白質的方法。
該方法第一向采用等電聚焦,根據復雜的蛋白質成分中各個蛋白質等電點不同,將蛋白質進行分離。第二向采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳,按蛋白質分子量的大小使其在垂直方向進行分離。其結果呈現為斑點狀。
免疫電泳(Immunoelectrophoresis)是瓊脂平板電泳和雙向免疫擴散兩種方法的結合。將抗原樣本在瓊脂平板上先進行電泳,使其中的各種成份彼此分開,然后加入抗體做雙向免疫擴散,已分離的各抗原成分與抗體在瓊脂中擴散而相遇,在兩者比例適當的地方形成復合物,呈現出可見的沉淀弧。
根據自動化程度不同分為:半自動電泳和全自動電泳。
根據用途不同分為:蛋白電泳、核酸電泳等。
根據原理不同分為:等速電泳、等電聚焦電泳、免疫電泳等。
根據電泳中是否使用支持介質分為:自由電泳和區帶電泳。
物質分子在正常情況下一般不帶電,即所帶正、負電荷量相等,不顯示帶電性。但是在一定的物理作用或化學反應條件下,某些物質分子會成為帶電的粒子。利用帶電粒子因帶電性質、顆粒形狀、大小及所帶電量不同會導致移動速度及方向也不同的性質,實現對樣本中不同成分的分離和分析。
不同公司生產的,不同型號的操作都不一樣的吧。便攜的很好用的,基本上照一下就出來了??蒲杏玫拇笮凸庾V儀有專門的售后指導的,使用起來也很復雜?;旧暇褪枪庠闯龉?,照到樣品上,或反射或透射接收后同過軟件分析...
測定原理總有機碳(TOC),由專門的儀器——總有機碳分析儀(以下簡稱TOC分析儀)來測定。TOC分析儀,是將水溶液中的總有機碳氧化為二氧化碳,并且測定其含量。利用二氧化碳與總有機碳之間碳含量的對應關系...
一般說來,一臺功能較為齊全的音頻分析儀器應能測量信號交直流電壓、信號頻率、諧波失真、信噪比等參數。功能強大的音頻分析儀器提供頻譜分析、1/3倍頻程分析、倍頻程分析、聲壓級測量等功能。如果要組建...
電場強度越大,電泳速度越快。但增大電場強度會引起通過介質的電流強度增大,從而造成電泳過程中產熱過多,引起介質溫度升高,影響電泳效果。降低電流可以減少產生熱量,但會延長電泳時間,減慢待分離生物大分子的擴散而影響分離效果。
主要體現為樣本溶液的pH、離子強度和黏度等。pH影響帶電粒子的解離程度,決定物質所帶凈電荷的多少。當pH為蛋白質的等電點時,蛋白質所帶凈電荷為零,此時蛋白質在電場中不會發生移動。
適合電泳的離子強度為0.02-0.2。離子強度過高,帶電顆粒會將溶液中與其電荷性相反的離子吸引在自己周圍形成離子擴散層,從而降低粒子的電泳遷移速度。離子強度過低,電泳遷移速度會因為溶液pH變化而受到影響。
溫度過高引起樣本分離帶加寬;溫度過高產生對流,易引起待分離物的混合;對熱敏感樣本易引起蛋白質變性;導致介質黏度降低、電阻下降,影響電泳效果。
電滲是指電泳過程中液體對固體的相對移動。如果電滲方向與待分離分子電泳方向相同,則電泳速度加快,反之則減慢。
支持介質的篩孔具有分子篩的作用,能夠分離分子。其大小對待分離生物大分子的電泳速度有明顯影響。篩孔大的介質中,電泳速度快,反之則慢。此外,只是介質的黏性可阻礙泳動,起到吸附作用。
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電泳設備使用注意事項 ( 1)一般金屬表面的電泳涂裝,其工藝流程為: 預清理→上掛→除油→水洗→除銹→水洗→磷化→水洗→鈍化→電泳→噴淋→水洗→烘 干→下掛。 (2)電泳工件的底材及前處理對電泳涂膜有極大影響。 鑄件一般采用噴砂或噴丸進行除銹,用棉紗清除工件表面的浮塵,用 80#~120#砂紙清 除表面殘留的鋼丸等雜物。 鋼鐵表面采用除油和除銹處理, 對表面要求過高時, 進行磷化和 鈍化表面處理。 黑色金屬工件在陽極電泳前必須進行磷化處理, 否則漆膜的耐腐蝕性能較差。 磷化處理時,一般選用鋅鹽磷化膜,厚度約 1~2μm,要求磷化膜結晶細而均勻。 (3)在過濾系統中,一般采用一級過濾,過濾器為網袋式結構,孔徑為 25~75μm。 電泳涂料通過立式泵輸送到過濾器進行過濾。從綜合更換周期和漆膜質量等因素考慮, 孔徑 50μm 的過濾袋最佳,它不但能滿足漆膜的質量要求,而且解決了過濾袋的堵塞問題。
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電泳法可分為自由電泳(無支持體)及區帶電泳(有支持體)兩大類。
自由電泳包括Tise-leas式微量電泳、顯微電泳、等電聚焦電泳、等速電泳及密度梯度電泳。
區帶電泳則包括濾紙電泳(常壓及高壓)、薄層電泳(薄膜及薄板)、凝膠電泳(瓊脂、瓊脂糖、淀粉膠、聚丙烯酰胺凝膠)等。
圓盤電泳槽:有上,下兩個電泳槽和帶有鉑金電極的蓋。上槽中具有若干孔,孔不用時,用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插電泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。電泳管的內徑早期為5~7mm,為保證冷卻和微量化,現在則越來越細。
垂直板電泳槽:垂直板電泳槽的基本原理和結構與圓盤電泳槽基本相同。差別只在于制膠和電泳不在電泳管中,而是在兩塊垂直放置的平行玻璃板中間。
水平電泳槽:水平電泳槽的形狀各異,但結構大致相同。一般包括電泳槽基座,冷卻板和電極。
要了解電泳整流器首先要了解什么是電泳
電泳是電泳涂料在陰陽兩極,施加于電壓作用下,帶電荷之涂料離子移動到陰極,
并與陰極表面所產生之堿性作用形成不溶解物,沉積于工件表面。