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一、砧木的選擇。(一)嫁接親和力:從樹木學的角度分析,旱柳和垂柳同屬楊柳科柳屬。生產實踐證明,與垂柳親和力的排名依次為旱柳、金絲柳、黃柳。(二)生物學特性:旱柳還具有根系發達、干性良好、壽命長、抗病蟲害
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為了豐富柳樹分子標記的手段,以旱柳Salix matsudana為材料,通過正交實驗設計法,獲得適于旱柳的相關序列擴增多態性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)-聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)體系;對SRAP-PCR擴增過程中的2次退火溫度進行優化。結果如下:優化反應體系,25.00μL反應液中,含20.84nkat的Taq酶,2.00μL Mg2+(25.00mmol·L-1),2.50μL堿基混合物(脫氧核糖核苷酸dNTPs,各2.50mmol·L-1),1.50μL引物(20.00μmol·L-1),100.00ng DNA模板,2.50μL10×Taq酶緩沖液。擴增程序,94℃2.0min;94℃1.0min,38℃1.0min,72℃1.5min,5個循環;94℃1.0min,54℃1.0min,72℃1.5min,30個循環;72℃10.0min。經聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)檢測,特征性條帶清晰,信息量大,完全可以用于旱柳基因組的研究分析。
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