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目的:探討在副溶血性弧菌食物中毒檢測中使用實時熒光定量PCR的臨床價值。方法:選取30份衛生防疫站食物中毒患者肛拭子標本,均采用GB與實時熒光定量PCR檢測,對比兩種檢測方法陽性率。結果:直接檢測GB法陽性率為23.3%,PCR法陽性率為100.0%,對比差異有統計學意義(P0.05)。結論:在副溶血性孤菌食物中毒檢測中使用實時熒光定量PCR檢測價值重大,可推廣使用。
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目的:建立快速、靈敏、特異地檢測金黃色葡萄球菌腸毒素A的熒光定量PCR檢測方法。方法:以SEA基因作為腸毒素A的檢測靶序列,設計熒光定量PCR引物和Taqman探針,優化反應體系的主要成分濃度和循環條件,評價方法的靈敏度、特異性和重復性,并對22株食物中毒中分離的金黃色葡萄球菌進行腸毒素A的檢測。結果:建立金黃色葡萄球菌腸毒素A的熒光定量PCR檢測方法。25μl熒光定量PCR反應體系主要成分濃度分別為Mg2+7.0 mmol/L,dNTP 0.3 mmol/L,引物0.4μmol/L,探針0.7μmol/L,TaqDNA聚合酶2.5U。方法可檢出最低45個拷貝的細菌DNA,特異性和重復性良好。從22株食物中毒中分離的金黃色葡萄球菌中檢出腸毒素A陽性菌株6株。結論:熒光定量PCR可快速、準確的檢出金黃色葡萄球菌的腸毒素A,能為金黃色葡萄球菌食物中毒診斷提供依據。
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