核苷磷酸化酶通式(I)的化合物，它們是嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)、嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(PPRT)、5'-甲硫基腺苷磷酸化酶(MTAP)、5'-甲硫基腺苷核苷酶(MTAN)和/或核苷水解酶(NH)的抑制劑。本發(fā)明還涉及這些化合物在治療包括癌癥、細(xì)菌感染、原生動(dòng)物感染、T-細(xì)胞介導(dǎo)的疾病在內(nèi)的疾病和感染中的應(yīng)用，并涉及含有這些化合物的藥物組合物。

通過雙酶切方法將重組質(zhì)粒上大腸桿菌嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)基因克隆到pBV220表達(dá)載體上，構(gòu)建了溫敏型PNPase的表達(dá)載體pBV220-PNP，轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α并使之表選。SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示出明顯的特異表達(dá)條帶，其分子量約為26kDa。在此基礎(chǔ)上研究了不同誘導(dǎo)條件對(duì)蛋白表達(dá)量的影響分別以肌苷和尿苷為核糖供體研究重組菌轉(zhuǎn)化腺苷的條件，發(fā)現(xiàn)肌苷最適合作為核糖供體，在30mmol·L^(-1)pH7.5的Na2HPO4-KH2PO4緩沖液中，以30mmol·L肌苷和10mmol·L^(-1)腺漂呤作底物，加入0.5%基因工程濕菌體60℃反應(yīng)3h，腺苷的轉(zhuǎn)化率為85.57%。

以次黃苷+磷酸次黃嘌呤+核糖-1-磷酸的方式，參與將核苷加磷酸分解成五碳糖磷酸反應(yīng)的酶之總稱。已知有幾種對(duì)底物的特異性不同，如嘌呤核苷磷酸化酶(EC2.4.2.1)對(duì)鳥苷、脫氧鳥苷、次黃苷、脫氧次黃苷具有作用，它存在于脾、肺、肝、心肌、紅血球、酵母中，小腸和血液中也有少量存在。另外已知嘧啶核苷磷酸化酶是對(duì)尿苷和胸腺苷分別具有特異性的酶。推測(cè)主要是分解核苷或具有供給合成其它核苷所需的核糖磷酸的作用。

核苷磷酸化酶